Shanghai Kekai Biotechnology Co., Ltd.

重组肠激酶
特异性高，纯度高
1.产品简介
肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化，纯度高，特异性高，并且不含其他蛋白酶。肠激酶（EC 3.4.21.9）是一个特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。
高特异性
1）特定的蛋白酶，切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸 (DDDDK)
2）不含其他蛋白酶,无非特异性切割
图一：SDS-PAGE检测结果，纯化的肠激酶一个单一的主带
图二：1U的EK作用于50ug底物0min,10 min,20 min,30 min,40 min,50 min,60 min后的SDS-PAGE分析
图三：1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析

酶切条件：
按照酶活性定义，重组EK酶切条件举例：25mM Tris-HCl 8.0体系中：
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml （蛋白总量50-100µg）
重组EK用量 1-2U
温度 25℃
过夜酶切，或完全酶切需12h-16h。

常见影响肠激酶活性的因素
在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：
1）为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，再进行酶切。
2）若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切50µg蛋白）。
3）如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。

3.产品用途
用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签

产品型号：KK-T008
CAS: 9014-74-8
EC:3.4.21.9
公司名称：上海科开生物技术有限公司